文章目录

材料和方法

1 动物

2 主要试剂

3 主要方法

    3.1 Fat-1+/+小鼠的基因型鉴定

    3.2 小鼠DCM模型的构建

    3.3 超声心动图测定心功能

    3.4 口服葡萄糖耐量实验（oral glucose tolerance test,OGTT)

    3.5 RT-q PCR检测心肌组织的m RNA表达

    3.6 Western blot检测心肌组织的蛋白水平

4 统计学处理

结果

1 n-3 PUFAs对DCM小鼠血糖和体重的影响

2 n-3 PUFAs改善DCM小鼠左心室收缩功能

3 n-3 PUFAs改善DCM小鼠左心室舒张功能

4 n-3 PUFAs抑制DCM小鼠心肌凋亡和纤维化相关分子的表达

5 n-3 PUFAs抑制DCM小鼠心肌组织中NLRP3炎症小体的活化

讨论

文章摘要:目的:探讨n-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFAs）对糖尿病心肌病（DCM）小鼠心脏的保护作用及调控机制。方法:将6～8周龄雄性野生型（WT）C57BL/6J小鼠和Fat-1（编码n-3脂肪酸脱饱和酶,促n-3 PUFAs合成）转基因(Fat-1^+/+)小鼠随机分成4组:WT组、Fat-1^+/+组、WT+DCM组和Fat-1^+/++DCM组。通过腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素并以45%高脂饲料喂养20周建立DCM模型;对照组则腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液并给予普通饲料喂养。造模期间每隔2周测定小鼠血糖及体重,并采用小动物超声仪检测小鼠左心室收缩及舒张功能变化。DCM造模结束后进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）,并采用RT-qPCR和Western blot检测心肌凋亡、纤维化及NLRP3炎症小体通路相关分子的mRNA和蛋白水平。结果:DCM造模20周后,WT+DCM组和Fat-1^+/++DCM组小鼠血糖比造模前均显著升高且体重显著降低（P<0.05）,但Fat-1^+/++DCM组与WT+DCM组相比血糖显著降低,体重显著升高,OGTT曲线下面积显著减少（P<0.01）。心脏超声检测结果显示DCM造模20周后WT+DCM组和Fat-1^+/++DCM组小鼠左心室收缩功能（LVEF和LVFS）和舒张功能（E/A和E’/A’）与造模前相比均显著降低,但Fat-1^+/++DCM组小鼠左心室收缩和舒张功能较WT+DCM组显著改善（P<0.01）。RT-qPCR和Western blot检测结果显示,心肌组织中凋亡执行蛋白caspase-3和促纤维化蛋白TGF-β的表达在DCM造模后均显著升高,但Fat-1^+/++DCM组两者表达均比WT+DCM组显著减少（P<0.05）。此外,经DCM造模后心脏组织中NLRP3炎症小体及相关炎症细胞因子（NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和IL-18）的mRNA和蛋白表达水平较造模前均显著升高,但其在Fat-1^+/++DCM组较WT+DCM组显著降低（P<0.05）。结论:n-3 PUFAs对糖尿病小鼠的血糖、体重及左心室收缩和舒张功能均有显著改善作用;其机制可能是通过减少心肌细胞凋亡和纤维化并抑制NLRP3炎症小体及相关炎症因子的转录激活,从而减轻心肌损伤。

文章关键词:n-3多不饱和脂肪酸,糖尿病心肌病,NLRP3炎症小体,Fat-1转基因小鼠,

项目基金:广东省自然科学基金资助项目（No.2018A030313593;No.2019A1515011300）,

论文作者:陈显桐 左盛佳 李可欣 刘已斌 王超群 肖佩仪 赵泽新 余细勇 江雪燕 

论文分类号: R587.2;R542.2

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文章来源：中国临床药理学与治疗学 网址: http://zglcylxyzlx.400nongye.com/lunwen/itemid-81225.shtml

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